ECL化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒常見問題
更新時(shí)間：2019-10-30 點(diǎn)擊次數(shù)：2854
愛必信熱賣單品ECL化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒，靈敏度更高，背景更低，穩(wěn)定性更好。常備現(xiàn)貨， 小編整理了ECL 的常見問題，助您的實(shí)驗(yàn)更順利！ | 問題 | 原因 | 方法 | | 白色條帶黑色背景 | 體系中HRP過量 | 進(jìn)一步稀釋HRP 標(biāo)記 | | 膜上有棕色或黃色條帶 | | 背景發(fā)亮 | | 信號(hào)弱或無信號(hào) | HRP過量，消耗底物 | 進(jìn)一步稀釋HRP 標(biāo)記 | | 抗原或抗體不足 | 增加抗體 | | 使用超級(jí)ECL | | 轉(zhuǎn)膜失敗 | 優(yōu)化轉(zhuǎn)膜條件 | | HRP 活性低 | 測(cè)試HRP 活性：暗室中，將1ul未稀釋的HRP 放入裝有1-2ml的基質(zhì)工作
溶液的試管中。 幾分鐘內(nèi)，溶液會(huì)立即發(fā)出藍(lán)光。 | | 高背景 | HRP過量，消耗底物 | 進(jìn)一步稀釋HRP 標(biāo)記 | | 封閉不充分或使用了不適當(dāng)?shù)姆忾]試劑 | 優(yōu)化轉(zhuǎn)膜條件 | | 洗滌不充分 | 增加洗滌時(shí)間和次數(shù) | | 膜過度曝光 | 減少曝光時(shí)間 | | 抗原、抗體 過量 | 減少抗體上樣量 | | 抗體特異性差 | 優(yōu)化抗體特異性 | | 條帶有斑點(diǎn) | 轉(zhuǎn)膜失敗 | 優(yōu)化轉(zhuǎn)膜條件 | | x射線膠片與膜之間有氣泡 | 去除所有氣泡后，再曝光到膠片上 | | 背景有斑點(diǎn) | 形成聚合體 | 使用前通過0.2um過濾器過濾hrp -偶聯(lián)物 | | 電泳轉(zhuǎn)移過程中溫度過高 | 控制電泳和轉(zhuǎn)移過程中的溫度 | | 非特異性條帶 | HRP-偶聯(lián)物過量 | 進(jìn)一步稀釋hrp -偶聯(lián)物 | | SDS導(dǎo)致非特異性蛋白結(jié)合 | 在免疫檢測(cè)過程中不要使用SDS | | 抗體特異性差 | 優(yōu)化抗體特異性 |
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二抗、標(biāo)簽抗體、對(duì)照抗體；WB相關(guān)：ECL發(fā)光液、預(yù)染marker、預(yù)制膠；IHC相關(guān)：二抗試劑盒、組化筆；IP/CoIP試劑盒；細(xì)胞因子、信號(hào)通路調(diào)節(jié)劑；血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE；凋亡試劑盒、呼吸爆發(fā)試劑盒；動(dòng)植物提取物，定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白)...  愛必信(上海)生物科技有限公司 公眾平臺(tái)：愛必信生物 |
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