重組蛋白——熱門免疫檢查點(diǎn)

什么是Fc Chimera？什么是His Tag？

Fc即fragment crystallizablc，是免疫球蛋白的重鏈片段，能從溶液中結(jié)晶出來，呈明顯的均一性，故被稱為結(jié)晶片段；Chimera是嵌合體的意思。因此帶有這個后綴的重組蛋白，意思是將某種具有生物活性的功能蛋白分子（如PD-1）與免疫球蛋白（IgG、IgA 等）的 Fc片段融合而產(chǎn)生的新型重組蛋白。

His-tag即His 標(biāo)簽又稱多組氨酸標(biāo)簽，由6到10個連續(xù)的組氨酸殘基組成，是當(dāng)前的標(biāo)簽蛋白，可插入在目的蛋白的C末端或N末端。當(dāng)某一個標(biāo)簽的使用，一是能構(gòu)成表位利于檢測；二是構(gòu)成*的結(jié)構(gòu)特征（結(jié)合配體）利于純化。

PD-1/PD-L1

PD-1（程序性死亡受體1），也稱為CD279（分化簇279），是一種重要的免疫抑制分子。通過向下調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)對人體細(xì)胞的反應(yīng)，以及通過抑制T細(xì)胞炎癥活動來調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)并促進(jìn)自身耐受。這可以預(yù)防自身免疫性疾病，但它也可以防止免疫系統(tǒng)殺死癌細(xì)胞。

PD-L1（細(xì)胞程序性死亡-配體1）也稱為表面抗原分化簇274（cluster of differentiation 274，CD274）或 B7同源體（B7 homolog 1，B7-H1），是人類體內(nèi)的一種蛋白質(zhì)，由CD274基因編碼，能夠與PD-1結(jié)合，抑制T細(xì)胞增殖以及細(xì)胞因子分泌，負(fù)調(diào)控淋巴細(xì)胞的激活。PD-L1除了會表達(dá)在腫瘤表面，參與免疫逃逸，還會在IFN-γ刺激下，表達(dá)在抗原提呈細(xì)胞（DC細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等），以及血管內(nèi)皮細(xì)胞的表面。

SIRP-α/CD47

Sirp-α即信號調(diào)節(jié)蛋白α(signal regulatory protein α)，也稱為Src homology 2 domain-containing protein tyrosine phosphatase substrate-1 (SHPS-1)，在髓系造血細(xì)胞（e.g. 巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞）和神經(jīng)細(xì)胞表面均有表達(dá)；其配體是CD47，也稱整合素相關(guān)蛋白(integrin-associated protein，IAP)，廣泛表達(dá)于幾乎所有正常細(xì)胞的表面。Sirp-α主要表達(dá)在巨噬細(xì)胞表面，與其他細(xì)胞上的CD47結(jié)合后，可向巨噬細(xì)胞傳遞抑制性信號，抑制巨噬細(xì)胞對靶細(xì)胞的吞噬作用。因此，這條通路可用來識別己細(xì)胞（self）與非己細(xì)胞（non-self）。一些腫瘤細(xì)胞利用這個機(jī)制，高表達(dá)CD47來向巨噬細(xì)胞發(fā)出“別吃我"信號，來進(jìn)行免疫逃逸。

B7-H3/CD276

B7-H3（CD276）是B7家族的一員，同時也是一個在細(xì)胞表面表達(dá)的重要免疫檢查點(diǎn)分子。它在免疫系統(tǒng)中具有雙重作用。首先，B7-H3作為共刺激因子，對T細(xì)胞具有共刺激作用，誘導(dǎo)細(xì)胞免疫。其次，B7-H3也具有共抑制作用，使腫瘤逃避免疫反應(yīng)和抑制NK細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞裂解。

B7-H3在正常組織中很少表達(dá)，而在大多數(shù)惡性腫瘤（如黑色素瘤、腎細(xì)胞癌、卵巢癌等）中異常表達(dá)，且與許多腫瘤的不良預(yù)后相關(guān)。目前，還沒有B7-H3靶向療法被批準(zhǔn)用于治療任何癌癥。B7-H3的確切功能和受體尚未闡明，但以此為靶點(diǎn)的抗體藥物、抗體偶聯(lián)物（ADC）、CAR-T細(xì)胞治療領(lǐng)域近年來發(fā)展迅速。

TIGIT

TIGIT（T cell Ig and ITIM domain, 也稱為WUCAM，Vstm3，VSIG9）是脊髓灰質(zhì)炎病毒受體（PVR）/Nectin家族的成員。它由細(xì)胞外免疫球蛋白可變區(qū)（IgV）結(jié)構(gòu)域，1型跨膜結(jié)構(gòu)域和具有經(jīng)典免疫受體酪氨酸抑制基序（ITIM）和免疫球蛋白酪氨酸尾（ITT）基序的細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域組成。

TIGIT在淋巴細(xì)胞中表達(dá)，特別是在效應(yīng)和調(diào)節(jié)性CD4+ T細(xì)胞，濾泡輔助CD4+ T細(xì)胞，效應(yīng)CD8+ T細(xì)胞和自然殺傷（NK）細(xì)胞中高表達(dá)。它的配體有CD155（高親和力）、CD112、CD113。

TIGIT可以在腫瘤免疫循環(huán)的多個步驟中抑制免疫細(xì)胞。

STEP1. TIGIT可以通過阻止腫瘤細(xì)胞的初始死亡和釋放腫瘤抗原來抑制NK細(xì)胞效應(yīng)；
STEP2. TIGIT抑制樹突細(xì)胞協(xié)同刺激能力，導(dǎo)致癌抗原呈遞減少和抗炎細(xì)胞因子如IL-10增加, TIGIT還可以誘導(dǎo)其他細(xì)胞如腫瘤細(xì)胞的PVR信號傳導(dǎo)；
STEP3. TIGIT+ Tregs或PVR刺激的髓樣細(xì)胞可以抑制CD8+ T細(xì)胞效應(yīng)或偏斜CD4+ T細(xì)胞的極化;
STEP4. TIGIT可以直接抑制CD8+ T細(xì)胞效應(yīng)，或者TIGIT+ Treg可以抑制CD8+ T細(xì)胞，防止癌細(xì)胞的清除。

NT-proBNP

NT-proBNP是由心室分泌，通過心肌細(xì)胞拉伸進(jìn)入血液循環(huán)，它是一種含76個氨基酸的直鏈多肽，不具有生物學(xué)活性，半衰期長，體外穩(wěn)定，血液中濃度高。NT-proBNP能夠參與鈉調(diào)節(jié)、維持血壓動態(tài)、平衡組織、利尿，促進(jìn)尿鈉排泄、擴(kuò)張血管等。臨床上主要用于心衰、急性呼吸困難的鑒別和心衰、急性冠脈綜合征的預(yù)后評估等。

熱門免疫檢查點(diǎn)重組蛋白：