今年九月，柴進(jìn)教授在EMBO Molecular Medicine (IF: 12.137)期刊上在線發(fā)表了題為“A homozygous R148W mutation in Semaphorin 7A causes progressive familial intrahepatic cholestasis”的文章（應(yīng)用了Absin六色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒——abs50030），提出了SEMA7A（信號(hào)素7A）中的一個(gè)純合子R148W突變會(huì)導(dǎo)致進(jìn)行性家族性肝內(nèi)膽汁淤積癥(PFIC)，并對(duì)其機(jī)制進(jìn)行了闡述。
進(jìn)行性家族性肝內(nèi)膽汁淤積癥（PFIC）是一種常染色體隱性遺傳性肝細(xì)胞性膽汁淤積癥，是由于基因突變所致膽汁分泌或排泄障礙形成的綜合征，以嚴(yán)重的皮膚瘙癢為特征。本病好發(fā)于兒童，一般在新生兒期就存在肝細(xì)胞性原發(fā)性膽汁淤積，在成年前因肝衰竭而死亡。
本次重大發(fā)現(xiàn)就是起因于一個(gè)患了PFIC的女嬰，在出生后的前2周表現(xiàn)出長(zhǎng)時(shí)間的黃疸和腸胃脹氣，接受治療后康復(fù)，并沒(méi)有什么后遺癥，然而在隨后的檢查中，她的肝功能檢查顯示血清ALT、AST和TBA水平異常高，進(jìn)一步醫(yī)學(xué)檢查排除了各種已知的肝病，于是研究人員就想到了PFIC——一種跟基因有關(guān)的肝內(nèi)膽汁淤積癥，排查了已知的PFIC相關(guān)基因在這個(gè)孩子體內(nèi)的突變以后，一個(gè)純合子（S267F）突變?cè)谠摶颊叩拟c/?；悄懰猁}共轉(zhuǎn)運(yùn)多肽（NTCP/SLC10A1）中被發(fā)現(xiàn)。雖然NTPC和SLC10A1功能的改變都可能導(dǎo)致類似該患者的癥狀，但是前者不會(huì)帶來(lái)肝損傷，后者在小鼠模型中也沒(méi)有表現(xiàn)出血清ALT、AST和TBA水平的升高，至此，這個(gè)病因也被排除。
那么究竟是哪里出了問(wèn)題？研究團(tuán)隊(duì)繼續(xù)從基因入手，使用各種遺傳模型對(duì)WGS數(shù)據(jù)進(jìn)行篩選，最后鎖定了SEME7A基因可能的錯(cuò)義變異（p.R148W），并且進(jìn)一步基因檢測(cè)結(jié)果也證實(shí)了患者的SEMA7A的基因組組織以及DNA和蛋白發(fā)生了變異（圖1）。研究團(tuán)隊(duì)隨后建立了Sema7aR145W純合子突變小鼠模型，與野生小鼠和雜合子小鼠比較，該純合子小鼠4周和8周齡血清中ALT、AST和TBA水平升高，并出現(xiàn)肝損傷，這一表現(xiàn)與Sema7aR148W純合子突變的患者十分類似。
PFIC是一種肝內(nèi)膽汁淤積癥，研究團(tuán)隊(duì)對(duì)小鼠模型的肝臟提取物進(jìn)行LC-MS/MS分析，最后結(jié)果顯示了Sema7aR145W純合子突變小鼠模型的肝臟中指示BA肝排泄受損的標(biāo)志物水平明顯升高，再進(jìn)一步對(duì)小管膜膽汁酸轉(zhuǎn)運(yùn)體、基底外側(cè)膜膽汁酸轉(zhuǎn)運(yùn)體、膽汁酸合成酶的mRNA轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物進(jìn)行檢測(cè)，并對(duì)各蛋白進(jìn)行Western blot檢測(cè)，其中最引人注意的是Bsep和Mrp2，這兩個(gè)蛋白在純合子小鼠組的表達(dá)量明顯低于野生小鼠和雜合子組，但他們mRNA轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的量并沒(méi)有下調(diào)（圖2）。
針對(duì)兩個(gè)特殊的蛋白，研究團(tuán)隊(duì)運(yùn)用了多重?zé)晒饷庖呓M化技術(shù)進(jìn)行染色，無(wú)論是對(duì)小鼠肝臟進(jìn)行檢測(cè)還是夾層膠原“三明治”法短期體外培養(yǎng)的原代肝細(xì)胞，熒光結(jié)果都顯示了Sema7aR145W純合子突變小鼠比野生小鼠組織細(xì)胞中的Bsep和Mrp2含量低（圖3）。
對(duì)膠原夾心培養(yǎng)中小鼠原代干細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染，分別轉(zhuǎn)染SEMA7A_WT或SEMA7A_R148W結(jié)構(gòu)物，并設(shè)置了不同的轉(zhuǎn)染劑量，進(jìn)行多染，結(jié)果顯示Sema7aR145W突變可降低肝臟Bsep和Mrp2蛋白的表達(dá)，并且轉(zhuǎn)染劑量越高，表達(dá)越低，呈劑量依賴性，兩種關(guān)鍵蛋白表達(dá)的降低最終也導(dǎo)致了肝內(nèi)膽汁淤積。
文末小彩蛋
Absin多重?zé)晒饷庖呓M化試劑盒能夠?qū)崿F(xiàn)單片多標(biāo)，無(wú)論是看腫瘤微環(huán)境還是看免疫浸潤(rùn)，無(wú)論是進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)還是共定位分析，我們都可以實(shí)現(xiàn)，目前最高可做到六指標(biāo)七色哦
| 貨號(hào) | 名稱 | 規(guī)格 |
| abs50030 | 六色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒（抗兔二抗） | 20T/100T |
Absin免疫組化試劑盒推薦
| 貨號(hào) | 名稱 | 規(guī)格 |
| abs50012 | 四色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒(鼠兔通用二抗） | 20T/100T |
| abs50013 | 五色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒（鼠兔通用二抗） | 20T/100T |
| abs50014 | 六色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒（鼠兔通用二抗） | 20T/100T |
| abs50015 | 七色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒（鼠兔通用二抗） | 20T/100T |
| abs50028 | 四色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒(抗兔二抗） | 20T/100T |
| abs50029 | 五色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒（抗兔二抗） | 20T/100T |
| abs50030 | 六色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒（抗兔二抗） | 20T/100T |
| abs50031 | 七色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒（抗兔二抗） | 20T/100T |
| abs50032 | 多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒(組合系列） | 100T |
文章中多重?zé)晒饷庖呓M化圖片
什么？沒(méi)有設(shè)備？不會(huì)做？沒(méi)關(guān)系！我們還提供mIHC服務(wù)！感興趣的老師可以在我們公眾號(hào)后臺(tái)留言哦~
Absin高分文獻(xiàn)展示欄
* Structures of Gi-bound metabotropic glutamate receptors mGlu2 and mGlu4（IF：49.962）——abs813885 VU 0364770
* The thermogenic activity of adjacent adipocytes fuels the progression of ccRCC and compromises anti-tumor therapeutic ef?cacy（IF：27.287）—— abs50013 五色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒（鼠兔通用二抗）+四支抗體
* Serine metabolism antagonizes antiviral innate immunity by preventing ATP6V0d2-mediated YAP lysosomal degradation（IF：27.287）——abs50001 Annexin V-FITC apoptosis assay kit
* An isocaloric moderately high-fat diet extends lifespan in male rats and Drosophila（IF：27.287）——abs139207 Rabbit anti-NCALD Polyclonal Antibody
* Genetically encoded fluorescent sensors reveal dynamic regulation of nAdPh metabolism（IF：26.919）——abs04123 Recombinant Human Interferon γ/IFN-γ
* SARS-CoV-2 envelope protein causes acute respiratory distress syndrome (ARDS)-like pathological damages and constitutes an antiviral target（IF：25.617）——abs520002 Mouse IL-2 ELISA Kit
* Inflammatory cell-derived CXCL3 promotes pancreatic cancer metastasis through a novel myofibroblast hijacked cancer escape mechanism（IF：23.059）——abs957 即用型高效免疫組化二抗試劑盒
* Myocardial ischemia‐reperfusion induced cardiac extracellular vesicles harbour proinflammatory features and aggravate heart injury（IF：21.22）——abs04259 Recombinant Mouse Tumor Necrosis Factor/TNFα
* SUCLA2-coupled regulation of GLS succinylation and activity counteracts oxidative stress in tumor cells（IF：17.97）——abs116416 Rabbit anti-GLS Polyclonal Antibody
......更多精彩文獻(xiàn)，詳見(jiàn)absin網(wǎng)站~
地址：上海市浦東新區(qū)新浩路58號(hào)申江科創(chuàng)園18棟
郵箱：
傳真：