細(xì)胞消化液的操作和使用

　　Accutase 細(xì)胞消化液是包含蛋白水解酶和膠原酶活性的一種細(xì)胞消化液，不含任何動(dòng)物和細(xì)菌來(lái)源組分。作為胰酶-EDTA 消化液的替換產(chǎn)品，用于從常規(guī)組織培養(yǎng)器皿、粘附包被培養(yǎng)器皿和聚合物上消化細(xì)胞。Accutase 比哺乳動(dòng)物源的胰酶和膠原酶更加有效，因其所含活性成分濃度更低，對(duì)細(xì)胞傷害更小且更溫和，但能維持相同效力。
 

　　使用方法：
 

　　1、4 ℃或冰浴融解Accutase，之后進(jìn)行分裝保存。
 

　　【注】：不可37 ℃融化本品，否則會(huì)影響酶活。
 

　　2、使用不含鈣、鎂的1×Dulbecco's PBS潤(rùn)洗細(xì)胞一次；
 

　　3、以無(wú)菌操作的方式，按 75 cm2表面積加入10 mL的Accutase覆蓋貼壁細(xì)胞；
 

　　4、重新放入37 ℃培養(yǎng)箱內(nèi)，消化5-10 min；
 

　　【注】：消化時(shí)間可自行調(diào)整。大部分細(xì)胞處于Accutase中高達(dá)1小時(shí)，對(duì)細(xì)胞狀態(tài)無(wú)影響。
 

　　5、消化結(jié)束后，輕輕敲擊培養(yǎng)皿，使細(xì)胞與皿底部脫離，依照常規(guī)操作進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)和傳代。
 

　　【注】：不需另做清洗和酶活終止步驟。
 

　　細(xì)胞消化液的注意事項(xiàng)：

 

　　1、Accutase™融化后4℃保存，至少2個(gè)月穩(wěn)定。不可室溫保存。也可分裝成單次用量，放到-80 ℃凍存，有效期2年。
 

　　2、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
 

　　3、本產(chǎn)品主要用于科研領(lǐng)域，不宜用于臨床診斷或其他用途。