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    探秘黑膠蟲(上)

    更新時間:2023-05-19      點擊次數(shù):1680

    黑膠蟲污染是一個老生常談的話題。目前,科研界對黑膠蟲的污染特征沒有統(tǒng)一的判定標準,通常污染特征總結(jié)有:

    1)活躍游動或旋轉(zhuǎn)梭動或原地顫動(如視頻1、2、3所示);



    視頻1 活躍游動


    視頻2 旋轉(zhuǎn)梭動


    視頻3 原地顫動


    2)
    呈桿狀、球狀、卵圓狀;

    3)培養(yǎng)基不渾濁;

    4)復(fù)蘇或傳代時往往會出現(xiàn)黑膠蟲污染,并且與細胞呈現(xiàn)此消彼長的現(xiàn)象。

    我們對多個黑膠蟲樣本進行測序鑒定,這里舉兩個典型鑒定結(jié)果給大家分享:



    圖1 Sphingomonas(鞘氨醇單胞菌)單個及菌落圖

    屬名

    樣本2,15,21,27鑒定為Sphingomonas sp.(鞘氨醇單胞菌屬)

    能否游動

    以單側(cè)生極性鞭毛運動

    類別

    G-菌

    形狀

    桿狀;菌落為黃色

    大小

    0.3-0.8 * 1.0-2.7µm

    特點

    該菌屬至今共有12個種,是一類豐富的新型微生物資源,可用于芳香化合物的生物降解,在環(huán)境保護及工業(yè)生產(chǎn)方面具有巨大的應(yīng)用潛力

    分布范圍

    河水、根際、地表及深層的地下的沉積物、海洋,連極地土壤中都有它們的蹤跡


    圖2 Brevundimonas vesicularis(泡囊假單胞菌)單個及菌落圖

    屬名

    樣本4,19鑒定為Brevundimonas vesicularis(泡囊假單胞菌)屬于Brevundimonas sp.(短波單胞菌屬)

    類別

    G-菌

    形狀

    桿狀;菌落為圓形,凸起,表面濕潤光滑,邊緣整齊

    大小

    0.4-0.5X 1-2μm

    代表種

    泡囊短波單胞菌是一種較罕見的非發(fā)酵性病原性假單胞菌,在人體可引起肺炎、敗血癥、皮膚炎癥和壞死性蜂窩織炎等

    分布范圍

    通常存在于土壤、河流等自然界中


    這些黑膠蟲樣本被鑒定為細菌。另外我們也查閱了大批文獻,十幾年前就有人做了相關(guān)研究,很多都鑒定為細菌,例如以下這篇[1]



    圖3 客戶文獻截圖


    這篇文章講述的是,首先從黑膠蟲污染細胞樣本中分離得到黑膠蟲,然后從黑膠蟲中提取基因組
    DNA進行基因測序及分析,鑒定出的黑膠蟲為無色桿菌屬(Achromobacter)。

    細菌已經(jīng)在地球上存在三十多萬年了,具有不同的形狀,根據(jù)形狀主要分為三類,即:球菌、桿菌和螺旋菌(包括弧菌、螺菌、螺桿菌)(圖4)。鞭毛是著生在細菌表面的絲狀運動器官。由于鞭毛很細,只有用特殊的染色法,才能用光學(xué)顯微鏡觀察到。直徑12~25nm,長3~12μm,柔軟、波形(圖5)。


    圖4 細菌模式圖和細菌形狀分類



    圖5 細菌鞭毛分布圖

    單生(一根鞭毛著生于一端)

    雙生(兩根鞭毛分別著生于兩端)

    單叢生(一叢鞭毛著生于一端)

    雙叢生(兩叢鞭毛分別著生于兩端)

    周生(多根鞭毛遍布于菌體上)


    鞭毛有三種運動方式:在液體中泳動,在固體表面上滑行,在液體中旋轉(zhuǎn)梭動。所以難怪,我們看到的黑膠蟲不是在液體中活躍游動,就是在液體中旋轉(zhuǎn)梭動,這就和黑膠蟲被鑒定為細菌的結(jié)果相吻合了。

    黑膠蟲污染頑固,如何消殺,胞胞巴適有秘方——黑膠蟲清除劑,其所含有的多肽活性成分,相比傳統(tǒng)抗生素有效清除黑膠蟲;清除周期短,視黑膠蟲污染程度通常3-6天可有效去除;廣譜性強,可有效清除常見支原體污染。


    本期講解就到這了,請持續(xù)關(guān)注愛必信公眾號,等待探秘黑膠蟲(下)。

    [1] Jennifer Sue Gray, Janette Marie Birmingham, Jenifer Imig Fenton. Got black swimming dots in your cell culture? Identification of Achromobacter as a novel cell culture contaminant[J]. Biologicals, 2010, 38(2):273-7.

    注:圖源網(wǎng)絡(luò)和客戶,僅供參考學(xué)習用。


    表1 細胞培養(yǎng)類產(chǎn)品推薦

    貨號

    品名

    規(guī)格

    abs981

    胎牛血清(特級)

    500ml

    abs972

    胎牛血清(優(yōu)級)

    500ml

    abs974

    胎牛血清(標準級)

    500ml

    abs9483

    高糖DMEM培養(yǎng)基

    500ml

    abs9484

    RPMI-1640培養(yǎng)基

    500ml

    abs9505

    MEM培養(yǎng)基

    500ml

    abs9506

    α-MEM培養(yǎng)基

    500ml

    abs9554

    Ham's F-12培養(yǎng)基

    500ml

    abs9563

    Ham's F-12K培養(yǎng)基

    500ml

    abs9561

    DMEM/F-12培養(yǎng)基

    500ml

    abs962

    PBS緩沖液

    500ml

    abs970

    D-PBS緩沖液(不含 Ca2+ Mg2+

    500ml

    abs971

    D-PBS緩沖液(含 Ca2+ Mg2+)

    500ml

    abs9257

    Hanks平衡鹽溶液(不含 Ca2+ Mg2+)

    500ml

    abs9258

    Hanks平衡鹽溶液(含 Ca2+ Mg2+)

    500ml

    abs47014938

    胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%),含酚紅

    100ml

    abs47047375

    胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%),不含酚紅

    100mL

    abs9479

    無DMSO無血清細胞凍存液

    100mL

    abs9417

    無血清細胞凍存液

    100mL

    abs9473

    細胞凍存液(含血清)

    100mL

    abs9474

    組織保存液

    100ml

    abs9480

    組織凍存試劑盒

    30ml

    abs9486

    模具

    1個/套

    abs9487

    小刀

    5片/包

    abs9481

    組織復(fù)蘇試劑盒

    50ml

    abs9648

    黑膠蟲清除劑

    200ul

    abs42020125

    卡那霉素B硫酸鹽

    250mg

    abs42018967

    硫酸慶大霉素溶液

    10ml

    abs9244

    青鏈雙抗

    100ml

    abs9245

    青霉素-鏈霉素-慶大霉素混合溶液

    100ml

    abs42013298

    兩性霉素B

    1g

    abs44071148

    制霉菌素

    1g

    abs9246

    青霉素-鏈霉素-兩性霉素B混合溶液

    100ml

    abs9252

    支原體檢測試劑盒

    100T

    abs9375

    支原體清除試劑

    200uL×5

    abs9376

    支原體預(yù)防

    500uL×4

    abs816578

    環(huán)丙沙星鹽酸鹽

    500mg

    abs9374

    水盤抑菌劑

    20ml

    abs9371

    水浴鍋抑菌劑

    100ml

    abs9372

    培養(yǎng)箱除菌劑

    480ml

    abs9373

    細胞房除菌劑

    480ml




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