【IF 26.3】解碼腸道神經(jīng)免疫對(duì)話(huà)！研究揭示抗寄生蟲(chóng)防御新機(jī)制

在腸道健康研究領(lǐng)域，神經(jīng)與免疫的交互調(diào)控始終是前沿?zé)狳c(diǎn)。近期發(fā)表于國(guó)際頂刊《Immunity》（IF=26.3）的一項(xiàng)突破性研究 ——“Bi-directional communication between intrinsic enteric neurons and ILC2s inhibits host defense against helminth infection "，闡明了腸道局部神經(jīng)與免疫細(xì)胞的負(fù)反饋調(diào)控回路。而在這項(xiàng)高難度研究中，Absin 的兩款核心產(chǎn)品 ——正常驢血清（貨號(hào)：abs935） 與正常兔血清（貨號(hào)：abs946），憑借優(yōu)異的封閉性能，成為免疫熒光實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵支撐，助力科研團(tuán)隊(duì)精準(zhǔn)解析神經(jīng)元活化與細(xì)胞亞型定位。

研究核心：腸道 “神經(jīng) - 免疫" 的雙向制衡

腸道作為人體 “免疫與神經(jīng)的交匯樞紐"，當(dāng)遭遇寄生蟲(chóng)（如巴西日?qǐng)A線蟲(chóng)）入侵時(shí)，2 型固有淋巴細(xì)胞（ILC2）會(huì)分泌 IL-13 等細(xì)胞因子啟動(dòng)抗寄生蟲(chóng)防御；而腸內(nèi)固有神經(jīng)元（iENs）作為腸道 “本地神經(jīng)指揮中心"，是否參與這一過(guò)程長(zhǎng)期未知。

本研究團(tuán)隊(duì)通過(guò)單細(xì)胞測(cè)序、基因編輯小鼠模型等技術(shù)，揭示：寄生蟲(chóng)感染后，ILC2 分泌的 IL-13 會(huì)激活表達(dá) IL-13R 的 iENs 亞型（IPANs），被激活的 iENs 則通過(guò)分泌 β-CGRP 反向抑制 ILC2 活性，形成 “激活 - 抑制" 的雙向負(fù)反饋。這一機(jī)制既避免了免疫過(guò)度激活損傷腸道，也在一定程度上削弱了宿主的抗寄生蟲(chóng)能力，為寄生蟲(chóng)感染治療與炎癥調(diào)控提供了全新靶點(diǎn)。

Absin 驢血清、兔血清：免疫熒光實(shí)驗(yàn)的 “特異性守護(hù)者"

在這項(xiàng)涉及多維度細(xì)胞標(biāo)記、多物種抗體共染的研究中，免疫熒光染色是解析 iENs 活化狀態(tài)、定位 IL-13R?iENs 亞型的核心技術(shù)。而 Absin 的 abs935 與 abs946 血清產(chǎn)品，通過(guò)精準(zhǔn)封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn)，為實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性與重復(fù)性提供了關(guān)鍵保障，具體應(yīng)用場(chǎng)景及作用如下：

1、正常驢血清（abs935）：iENs 活化檢測(cè)的 “背景清除劑"

應(yīng)用場(chǎng)景：神經(jīng)元活化標(biāo)志物 c-FOS 的免疫熒光染色

研究的首要突破是驗(yàn)證 “寄生蟲(chóng)感染能否激活 iENs"。團(tuán)隊(duì)以神經(jīng)元特異性標(biāo)志物 HuC/D（紅色） 標(biāo)記 iENs，以活化標(biāo)志物 c-FOS（綠色） 標(biāo)記激活態(tài)神經(jīng)元，通過(guò)統(tǒng)計(jì) c-FOS?HuC/D?細(xì)胞比例，判斷 iENs 的活化程度。

Absin 正常驢血清abs935 的作用：

阻斷非特異性結(jié)合，降低背景干擾：腸道肌肉層組織（iENs 主要分布區(qū)域）含大量 Fc 受體，易與一抗（兔源抗 c-FOS 抗體、鼠源抗 HuC/D 抗體）非特異性結(jié)合，導(dǎo)致背景熒光紊亂。實(shí)驗(yàn)中，科研團(tuán)隊(duì)使用含 2% abs935 的封閉液預(yù)處理組織 —— 驢血清中的免疫球蛋白可優(yōu)先結(jié)合這些無(wú)關(guān)位點(diǎn)，避免一抗被 “誤吸附"，讓熒光信號(hào)更精準(zhǔn)地來(lái)自目標(biāo)蛋白。

兼容多物種抗體體系：本實(shí)驗(yàn)一抗來(lái)源涉及兔、鼠兩種物種，abs935（驢源）與兩者無(wú)交叉反應(yīng)，不會(huì)與一抗競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合靶點(diǎn)，保障雙標(biāo)染色的特異性。

2、正常兔血清（abs946）：IL-13R?iENs 亞型定位的 “精準(zhǔn)導(dǎo)航儀"

應(yīng)用場(chǎng)景：IL-13R?iENs 亞型的三重免疫熒光共染

為進(jìn)一步明確 “被 IL-13 激活的 iENs 亞型"，團(tuán)隊(duì)構(gòu)建了 IL-13R（Il13ra1）報(bào)告小鼠（IL-13RA1-TdTomato?），通過(guò)三重染色——HuC/D（藍(lán)色，標(biāo)記 iENs）、IL-13RA1-TdTomato（紅色，標(biāo)記 IL-13R?iENs）、c-FOS（綠色，標(biāo)記活化神經(jīng)元），驗(yàn)證 “僅 IL-13R?iENs 會(huì)被 IL-13 激活"。

Absin 兔血清abs946 的核心作用：

阻斷交叉反應(yīng)，保護(hù)鼠源一抗：實(shí)驗(yàn)中抗 HuC/D 抗體為鼠源，后續(xù)二抗為驢抗鼠 Cy5（藍(lán)色）。若組織中存在可與鼠源抗體交叉結(jié)合的位點(diǎn)，會(huì)導(dǎo)致 HuC/D 染色假陽(yáng)性。此時(shí)需用含 0.5% abs946 的封閉液二次封閉 —— 兔血清可預(yù)先結(jié)合這些交叉位點(diǎn)，確保 HuC/D 僅與特異性二抗結(jié)合，避免信號(hào)干擾。

保障亞型分析準(zhǔn)確性：通過(guò) abs946 處理，團(tuán)隊(duì)清晰觀察到：感染后，IL-13R?iENs 中 c-FOS?的比例（約 42%）顯著高于 IL-13R?iENs（約 9%），直接證實(shí) IL-13R 是 iENs 感知 IL-13 信號(hào)的關(guān)鍵受體。若缺乏 abs946 的封閉，交叉反應(yīng)會(huì)導(dǎo)致 IL-13R?iENs 中出現(xiàn)假陽(yáng)性 c-FOS 信號(hào)，干擾亞型分析。

本研究不僅揭示了腸道神經(jīng) - 免疫交互的全新機(jī)制，更為寄生蟲(chóng)感染治療（如阻斷 β-CGRP 增強(qiáng) ILC2 活性）、過(guò)敏性炎癥干預(yù)提供了新方向。 Absin 驢血清（abs935）和兔血清（abs946）從免疫熒光的封閉處理，到組織染色的信號(hào)保障，助力科研人員攻克技術(shù)難點(diǎn)。

參考文獻(xiàn)

Bi-directional communication between intrinsic enteric neurons and ILC2s inhibits host defense against helminth infection. Immunity. 2025 Jan 30 .

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