蛋白質(zhì)印跡(WesternBlot),相信大家對此都不陌生,做為檢測蛋白表達(dá)及半定量的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)方法,也是很多小伙伴們初入實(shí)驗(yàn)室的入門課?!吧鲜秩菀?,精通難”可謂對WB實(shí)驗(yàn)的注釋,初入實(shí)驗(yàn)室的“菜鳥”可以很快上手,做出漂亮的條帶,做過多年的“大神”也可能一著不慎,實(shí)驗(yàn)“翻車”,結(jié)果一塌糊涂。有些實(shí)驗(yàn)室甚至流傳著一些所謂的“玄學(xué)”,新手人品好,難做的條帶給新手做等等。真的是這樣么?實(shí)驗(yàn)技術(shù)可不是拼人品,靠運(yùn)氣的事兒,接下來小編將會為大家?guī)鞼B進(jìn)階技巧系列,干貨滿滿,讓大家提升W...
蛋白質(zhì)印跡(WB)用于測量不同條件下特定蛋白的變化。在蛋白質(zhì)印跡(WB)過程中涉及許多步驟,包括樣品制備、電泳、蛋白轉(zhuǎn)移、抗體孵育和信號檢測。為了解釋蛋白質(zhì)印跡實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,一個貫穿全過程的內(nèi)參是必須的。內(nèi)參可保證每個泳道中加入了相同量的蛋白樣品,不同泳道上的蛋白以相同的效率從凝膠轉(zhuǎn)到膜上,不同泳道上抗體孵育(對于一抗而言,必要的話也包括二抗)、信號檢測都是一致的。內(nèi)參的信號通常用來對目標(biāo)蛋白的信號進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。需要強(qiáng)調(diào)的是,對照蛋白抗體應(yīng)該與實(shí)驗(yàn)抗體在相同的印跡上進(jìn)行。不同的樣...
血清是由血漿去除纖維蛋白原而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理?xiàng)l件和營養(yǎng)條件不同而異。血清是血漿中不含纖維蛋白原的膠狀液體,具有維持血液的正常粘度、酸堿度、滲透壓等作用。它主要由水和各種化學(xué)成分組成,這些化學(xué)成分包括白蛋白、α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,總膽固醇,谷丙轉(zhuǎn)氨酶等。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機(jī)物等,這些物質(zhì)對促進(jìn)細(xì)胞生長或抑制生長活性...
血清是指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白原及某些凝血因子后分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營養(yǎng)物質(zhì),提供激素和各種生長因子,提供結(jié)合蛋白,提供促接觸和生長因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷、對培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用。血清的保存應(yīng)該注意以下幾點(diǎn):(1)需要長期保存的血清必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過1個月.由于血清結(jié)冰時(shí)體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻...
細(xì)胞處理●專業(yè)的細(xì)胞處理產(chǎn)品,含細(xì)胞分離、裂紅、固定、破膜及保存等全線產(chǎn)品?!竦蛢?nèi)毒素●經(jīng)無菌處理,更放心●即用型,更方便貨號名稱類型是否無菌應(yīng)用規(guī)格abs930淋巴細(xì)胞分離液-是人外周血淋巴細(xì)胞的體外分離50ml/100mlabs9102細(xì)胞分離液-是分離細(xì)胞,亞細(xì)胞顆粒,細(xì)菌,病毒100mlabs9101紅細(xì)胞裂解液即用型是裂解紅細(xì)胞,富集分離白細(xì)胞100ml/500mlabs9241紅細(xì)胞裂解液濃縮型(10X)是裂解紅細(xì)胞,富集分離白細(xì)胞100mlabs9110固定劑即...
【泛素綜述】泛素(ubiquitin)是一種存在于所有真核生物(大部分真核細(xì)胞)中的小蛋白。泛素由76個氨基酸組成,分子量大約8.451kDa。它的主要功能是標(biāo)記需要分解掉的蛋白質(zhì),使其被26S蛋白酶體降解。26S蛋白酶體上調(diào)節(jié)亞基上的一些受體可以識別K48和K11位連接的多聚泛素化蛋白,20S核心亞基在ATPase供能下水解底物。泛素也可以標(biāo)記跨膜蛋白,參與蛋白質(zhì)的膜泡運(yùn)輸。非典型泛素鏈在細(xì)胞信號傳導(dǎo),內(nèi)吞,以及DNA損傷修復(fù),調(diào)控NF-κB通路中起著重要作用。它在真核生物...
一眨眼五月已經(jīng)來臨,同學(xué)們經(jīng)歷了有史以來長的寒假回到實(shí)驗(yàn)室,想必都會有些恍如隔世的感jio。小愛將在5月15日下午4點(diǎn)進(jìn)行WB實(shí)驗(yàn)的直播,手把手的教大家如果快速高效的完成WB實(shí)驗(yàn),帶著你們的問題,來到小愛直播間一起暢聊WB實(shí)驗(yàn),還有精美互動禮品拿到手軟!直播主題:如何高效完成WB實(shí)驗(yàn)直播時(shí)間:5月15日下午4:00報(bào)名方式:關(guān)注下方“愛必信生物”公眾號,回復(fù)關(guān)鍵詞“WB”填寫報(bào)名信息有困難,找小愛,輕松實(shí)驗(yàn)不慌張~大家快來預(yù)約報(bào)名吧??!Absin特色產(chǎn)品線:WB相關(guān):ECL發(fā)...
組化作為基礎(chǔ)的免疫學(xué)實(shí)驗(yàn),每個小步驟中卻包含著決定成敗的技巧,這些你都知道嗎,就讓小編總結(jié)下給到你吧。1.固定:很好用4%的多聚甲醛固定液。對于冰凍切片,甲醛固定有時(shí)比冰凍丙酮好;但對于不同的組織和抗原,可選用不同的固定液。有時(shí)候商品化的抗體會有比較適合而推薦的固定液,請于購置前注意說明書。BouinS固定液:飽和picricacid750ml,甲醛250ml,冰醋酸50ml,其對組織的穿透力較強(qiáng),固定較好,結(jié)構(gòu)完整,但因偏酸,對抗原有一定損害,且組織收縮明顯,不適于組織標(biāo)本...
