使用磷酸化抗體時(shí),需要注意以下事項(xiàng)以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性:樣本處理:加入抑制劑:在裂解緩沖液(lysisbuffer)中必須加入蛋白酶抑制劑和適量的磷酸酶抑制劑,以抑制組織或細(xì)胞裂解過程中釋放的內(nèi)源性蛋白磷酸酶,防止磷酸化蛋白去磷酸化,從而維持蛋白質(zhì)的磷酸化狀態(tài)。確保裂解:建議使用裂解液裂解結(jié)合超聲處理,確保細(xì)胞充分裂解并剪切染色質(zhì)DNA。超聲處理時(shí)應(yīng)保持低溫,避免蛋白降解。新鮮樣本:使用新鮮制備的樣本,避免反復(fù)凍融,以減少磷酸基團(tuán)的降解??贵w孵育:低溫孵育:一抗孵育...
分辨率高,信號(hào)更強(qiáng)更穩(wěn)定、不容易淬滅使較弱靶點(diǎn)更易檢測一抗種屬來源無限制---------點(diǎn)擊提交多色服務(wù)意向--------任選即染指標(biāo)組合panel(最快一周出結(jié)果)8折!組織人小鼠T細(xì)胞CD3、CD4、CD8、FOXP3、CD45、CD103、CD21、CD23、CD31、CD69CD3、CD4、CD8、FOXP3、CD45、CD103、CD21、CD23、CD31、CD69巨噬細(xì)胞CD68、CD163、CD206、CD86、M-CSFF4/80、CD68、CD86、C...
在病理研究與臨床診斷領(lǐng)域,多重?zé)晒饷庖呓M化技術(shù)因其高效的多靶標(biāo)共定位能力,已成為科研與醫(yī)學(xué)工作者的重要工具。然而,傳統(tǒng)試劑盒常面臨信號(hào)強(qiáng)度不足、染料串色干擾等問題,導(dǎo)致成像模糊或結(jié)果誤判。為此,全新升級(jí)的七色多重?zé)晒饷庖呓M化增強(qiáng)版試劑盒應(yīng)運(yùn)而生,以革命性的“770染料雙重信號(hào)放大技術(shù)”為核心,重新定義熒光成像的清晰度與可靠性!技術(shù)突破:770染料雙重放大,信號(hào)強(qiáng)度與特異性雙提升本試劑盒的核心升級(jí)在于770nm染料的全新雙重放大體系。通過創(chuàng)新性引入“級(jí)聯(lián)信號(hào)增強(qiáng)”與“靶向共定位...
ELISA(Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay,酶聯(lián)免疫吸附測定)是一種基于抗原-抗體特異性結(jié)合的免疫學(xué)檢測技術(shù),利用酶標(biāo)記的抗體或抗原,通過酶催化的顯色反應(yīng)檢測目標(biāo)分子(如蛋白質(zhì)、抗體、激素等)的存在和含量。基本原理:1、抗原-抗體特異性結(jié)合:利用抗體識(shí)別特定抗原,或抗原結(jié)合特定抗體??梢苑譃橹苯臃?、間接法、夾心法、競爭法;2、酶標(biāo)記和顯色反應(yīng):結(jié)合特定酶(如辣根過氧化物酶HRP或堿性磷酸酶AP),通過底物反應(yīng)產(chǎn)生可檢測的顏色變化;3、定量分析:...
TR-FRET(時(shí)間分辨熒光共振能量轉(zhuǎn)移)TR-FRET(時(shí)間分辨熒光共振能量轉(zhuǎn)移)是一種結(jié)合了熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)和時(shí)間分辨熒光(TRF)的生物物理技術(shù).●熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET):當(dāng)一個(gè)熒光分子(供體)吸收光能后,可以將激發(fā)能量非放射性地傳遞給另一個(gè)分子(受體),條件是受體在空間上足夠接近供體(通常在1-10納米范圍內(nèi)),且供體的發(fā)射光譜與受體的激發(fā)光譜有重疊?!駮r(shí)間分辨熒光(TRF):通過在停止激發(fā)光源后測量熒光衰減,區(qū)分短壽命的背景熒光和長壽命的信號(hào)熒光。...
一、實(shí)驗(yàn)原理蛋白提取試劑盒通過溫和裂解細(xì)胞或組織釋放總蛋白,并利用特異性結(jié)合、離心分離及緩沖液洗脫等技術(shù)去除雜質(zhì)(如核酸、脂類等),最終獲得高純度、高活性的目標(biāo)蛋白。核心步驟:1、裂解:裂解液(含去污劑、蛋白酶抑制劑等)破壞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu),釋放胞內(nèi)蛋白;2、離心去除碎片:高速離心去除未裂解的細(xì)胞碎片、細(xì)胞核及大分子雜質(zhì);3、蛋白純化:通過離心柱或特異性結(jié)合樹脂選擇性吸附蛋白,雜質(zhì)隨廢液排出;4、洗脫:低鹽緩沖液或去離子水洗脫目標(biāo)蛋白,避免變性。二、材料準(zhǔn)備試劑盒:蛋白提取試劑盒(...
背景介紹裸露的RNA是帶負(fù)電荷的親水性大分子,因?yàn)榧?xì)胞膜的靜電排斥,難以進(jìn)入細(xì)胞,且易被無處不在的RNA酶快速降解,所以需要保護(hù)性外殼才能進(jìn)入細(xì)胞。細(xì)胞膜的組成主要是脂質(zhì),利用脂質(zhì)囊泡包封RNA穿過細(xì)胞膜并將RNA釋放到細(xì)胞質(zhì)中。囊泡應(yīng)該是一種帶正電的脂質(zhì),才能夠結(jié)合帶負(fù)電的RNA。然而,由永jiu性陽離子脂質(zhì)組成的囊泡由于能與帶負(fù)電的細(xì)胞膜發(fā)生靜電作用而引起細(xì)胞毒性,脂質(zhì)結(jié)構(gòu)才能夠?qū)?nèi)體酸性環(huán)境響應(yīng)而帶正電荷的分子。脂質(zhì)納米粒結(jié)構(gòu)LNP通常由四種關(guān)鍵成分組成:可離子化的陽離...
新生兒壞死性小腸結(jié)腸炎(NEC)是早產(chǎn)兒常見的致命腸道疾病,但其機(jī)制尚未wan全闡明。近期《Immunity》發(fā)表的一項(xiàng)研究揭示了膽汁酸受體FXR通過調(diào)控腸道上皮細(xì)胞鐵死亡和ILC3功能失調(diào)加劇NEC的分子機(jī)制,并提出了潛在治療靶點(diǎn)。本文帶您解析這項(xiàng)研究的關(guān)鍵技術(shù)、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與核心結(jié)論。一、核心實(shí)驗(yàn)技術(shù)全景本研究整合了多組學(xué)技術(shù)與前沿分子生物學(xué)手段,層層驗(yàn)證科學(xué)假說:1、單細(xì)胞RNA測序(scRNA-seq)分析NEC小鼠腸道上皮細(xì)胞(IECs)的轉(zhuǎn)錄組異質(zhì)性,鎖定FsXR在腸...
