CD44與CD62L系T細胞表面的兩類分子標識,于T細胞活化、遷移及功能的調控進程中占據關鍵地位。今天小愛帶您來看看這兩個指標對腫瘤細胞和T細胞種的標記作用。CD44是一種跨膜糖蛋白,屬于整合素家族。它廣泛表達于多種細胞類型,包括白細胞、內皮細胞、成纖維細胞和某些腫瘤細胞。細胞黏附和遷移:CD44通過與透明質酸(HA)結合,參與細胞的黏附、遷移和信號傳導。在免疫細胞中,CD44有助于T細胞和B細胞在淋巴組織中的定位和遷移。腫瘤生物學:CD44是腫瘤干細胞的標志物之一,參與腫瘤...
聚合酶鏈反應(PCR,PolymeraseChainReaction)由KaryMullis博士于20世紀80年代開發(fā)。該技術因其識別特定DNA序列并快速準確地合成大量副本的能力而被比作“分子復印機”。目前開發(fā)了各種基于原始PCR方法的衍生技術。實時PCR,也稱為定量PCR(qPCR),將PCR放大和檢測結合在一步中。另一種稱為逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)的技術使用RNA作為核酸起始模板。●PCR:包含DNA模板、DNA聚合酶、引物和dNTPs的反應混合物的重復加熱和冷...
1、目的蛋白以其他形式存在,最常見的情況●翻譯后修飾:如糖基化,常見接受糖基化的氨基酸是絲氨酸(Ser)、蘇氨酸(Thr)、天冬酰胺(Asn)和羥賴氨酸(Hydroxylysine),例如CD2,根據uniprot顯示,其預測分子量應該在39kda左右,但是表觀分子量一般在45kDa左右,這是由于CD2多個位點存在糖基化修飾,實際實驗中,如果想探究分子量差異是否是由糖基化引起的,可以加入糖苷酶PNGaseF切去糖基后,進行WB,而除了糖基化以外,還存在磷酸化,泛素化、甲基化、...
流程類器官原代培養(yǎng)流程原代一、準備工作1、儀器設備CO2培養(yǎng)箱、雙人單面超凈臺、倒置顯微鏡、臺式冷凍離心機、水浴鍋(abs72023)或水浴搖床,醫(yī)用冰箱、-80℃冰箱、移液器(一套)、眼科剪、眼科鑷2、試劑耗材(以腸癌為例)動物腦類器官培養(yǎng)基試劑盒(abs90050),基質膠(低因子、無酚紅)(abs9495),60mm細胞培養(yǎng)皿(abs7005),100μm濾篩(abs7009),15mL離心管(abs7102),1.5mLEP管若干(abs7119),24孔細胞培養(yǎng)板(...
在分子生物學和遺傳學的研究中,熒光原位雜交(FluorescenceInSituHybridization,FISH)技術是一項革命性的進展。它不僅為我們提供了一種強大的工具來研究基因的結構和功能,還幫助我們深入理解染色體異常與疾病之間的關系。本文將帶您穿越時間的長河,探索FISH技術的起源,以及它是如何發(fā)展成為現(xiàn)代分子生物學中重要的一部分。一、原位雜交技術的誕生原位雜交(InSituHybridization,ISH)技術的概念最早可以追溯到20世紀60年代。1969年,科...
一、實驗準備TILs提取培養(yǎng)試劑盒(abs90045)產品組成規(guī)格儲存條件及周期1TIL細胞擴增培養(yǎng)基A100mL4℃,3months或者-20℃,1年2TIL細胞激活培養(yǎng)基B30mL4/-20℃,2年3組織消化液C50mL4/-20℃,1年4分離液D20mL常溫5分離液E40mL常溫6細胞濾篩100μm常溫7組織緩沖液F2x250mL4/-20℃,2年8組織保存液G5x8mL4/-20℃,1年9凍存液H30mL4/-20℃,1年需要額外準備的試劑及耗材貨號品名規(guī)格儲存條件及...
CRISPR/Cas系統(tǒng)是細菌獲得性免疫的重要組成部分,由Cas核酸酶和兩種單獨的RNA成分組成,即可編程crRNA(CRISPRRNA)和固定的TracRNA(反式激活crRNA)。2012年,JenniferDoudna和EmmanuelleCharpentier發(fā)現(xiàn)Cas9可以當作DNA切割工具,CRISPR/Cas9技術才真正開始受到廣泛關注。CRISPR/Cas9調控機制1、CRISPR的轉錄:CRISPR被轉錄成一條長RNA(pre-crRNA),包含了重復序列和...
小鼠脾臟是一個重要的免疫器官,位于小鼠左側腹腔中,靠近胃的左側,呈長橢圓形狀。大小會根據小鼠的品種和健康狀況有所不同,一般來說,成年小鼠的脾臟長度大約在1.5厘米到2.5厘米之間。脾臟的顏色和質地可能會因為小鼠的品種和健康狀況而有所變化,通常呈現(xiàn)出類似葉片的形態(tài),顏色暗紅。在實驗研究中,小鼠脾臟細胞的分離、培養(yǎng)和計數(shù)是免疫學研究的重要方法,也是流式細胞術分析的前提。一、耗材與試劑表1小鼠脾臟解離部分試劑耗材參考表材料試劑設備15/50mL離心管1xPBS緩沖液水平恒溫搖床10...
