在之前的文章中，小愛為大家介紹了IHC的原理以及樣本處理的實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)：答應(yīng)我，看完再做IHC（上）今天我們繼續(xù)看看接下來的實(shí)驗(yàn)流程及操作要點(diǎn)。首先還是先來回顧一下IHC的整體流程：前期樣品處理的過程包括載玻片的制備，脫蠟/復(fù)水，抗原修復(fù)（上期內(nèi)容），然后我們需要做樣品的封閉，孵育一抗和二抗，以及底物檢測(cè)，最后的處理步驟包括脫水，封片和觀察。PART1我們介紹了樣品制備環(huán)節(jié)，今天我們繼續(xù)看下PART2抗體孵育及檢測(cè)。PART2抗體孵育及檢測(cè)（1）淬滅：如果使用基于酶或者生物素的檢...

重組蛋白是指利用DNA重組技術(shù)或重組RNA技術(shù)從而獲得并生產(chǎn)的蛋白質(zhì)。具體操作流程可以概括為利用中心法則采用基因重組分子克隆技術(shù)，獲得可以翻譯成目的蛋白的基因片段的重組載體，之后將其轉(zhuǎn)入可以表達(dá)目的蛋白的宿主細(xì)胞從而表達(dá)特定的重組蛋白分子。重組蛋白獲得的途徑分為體內(nèi)和體外生產(chǎn)，表達(dá)系統(tǒng)主要分為原核表達(dá)系統(tǒng)和真核表達(dá)系統(tǒng)。原核表達(dá)系統(tǒng)最常見的是利用大腸桿菌進(jìn)行表達(dá)，真核表達(dá)系統(tǒng)主要為酵母蛋白表達(dá)、哺乳動(dòng)物細(xì)胞蛋白表達(dá)（常用的細(xì)胞為CHO細(xì)胞、HEK293細(xì)胞）、昆蟲細(xì)胞蛋白表達(dá)...

概述腫瘤微環(huán)境(tumormicroenvironment,tme)是由腫瘤相關(guān)基質(zhì)細(xì)胞、免疫細(xì)胞，以及相應(yīng)細(xì)胞的分泌產(chǎn)物（如細(xì)胞因子和趨化因子）和細(xì)胞外基質(zhì)(ecm)中的非細(xì)胞成分組成的。腫瘤微環(huán)境為腫瘤提供了良好的生長(zhǎng)環(huán)境和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展和轉(zhuǎn)移，這也是臨床中導(dǎo)致許多個(gè)體患者常規(guī)治療失敗的原因。腫瘤類器官相對(duì)于pdx動(dòng)物模型，體外培養(yǎng)環(huán)境相對(duì)單純，而缺乏腫瘤微環(huán)境的類器官模型，又很難wan全模擬腫瘤對(duì)于藥物的反應(yīng)性，特別是免疫細(xì)胞隨著腫瘤類器官的培養(yǎng)，會(huì)逐漸功能下...

蛋白酶K，也稱為肽酶K或者精氨酸蛋白酶K，是一種重要的蛋白水解酶，廣泛存在于生物體內(nèi)，在細(xì)胞代謝、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、蛋白質(zhì)降解等生物學(xué)過程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。本文將介紹蛋白酶K的功能、結(jié)構(gòu)以及其在生物科學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用。蛋白酶K主要功能于泛素-蛋白酶體系統(tǒng)中，參與調(diào)控細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的降解和循環(huán)利用。其作用是通過降解不再需要的蛋白質(zhì)或者異常蛋白質(zhì)，從而維持細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)平衡。蛋白酶K能夠識(shí)別并切割具有特定氨基酸序列的泛素化蛋白，將其降解成短肽或者氨基酸，為細(xì)胞再利用提供原料。此外，蛋白...

一、抗體偶聯(lián)藥物ADC介紹抗體偶聯(lián)藥物(Antibody-DrugConjugate,ADC)，是一種通過連接子將抗體與具有生物活性的小分子細(xì)胞毒性載荷連接起來的新型高效生物藥物（圖1）。ADC藥物的三大元件包括：1）特異性靶向抗體；2）毒素；3）可裂解/不可裂解的連接子。異性靶點(diǎn)識(shí)別及有效的毒素作用使ADC成為名副其實(shí)的“生物導(dǎo)dan”。ADC藥物的開發(fā)具有較高的技術(shù)壁壘，需要綜合考慮靶點(diǎn)的合理選擇；抗體、連接子、小分子藥物及它們之間的合理組合；抗體偶聯(lián)技術(shù)以及ADC藥物的...

IHC實(shí)驗(yàn)是科研人bi備的實(shí)驗(yàn)技能之一，然而IHC實(shí)驗(yàn)流程復(fù)雜，而且經(jīng)常出現(xiàn)假陰性的結(jié)果，常常讓人頭疼。為此特別給大家整理了一份IHC實(shí)驗(yàn)詳解，原理，步驟，注意事項(xiàng)及操作視頻一網(wǎng)打盡，想做IHC實(shí)驗(yàn)只看這篇就夠了（分為上下兩篇哦）。IHC實(shí)驗(yàn)原理免疫組織化學(xué)(Immunohistochemistry，IHC)：利用抗原－抗體特異性結(jié)合的原理，通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑顯色以確定細(xì)胞內(nèi)抗原，并對(duì)其進(jìn)行定位、定性及定量的研究。和WB實(shí)驗(yàn)相比，IHC實(shí)驗(yàn)可以更為直觀的展現(xiàn)待測(cè)蛋...

2022年，“生物大分子與微生物組”被列為國(guó)自然重點(diǎn)項(xiàng)目，由此掀起了空間蛋白組學(xué)技術(shù)的研究熱潮，其中免疫組織化學(xué)（IHC，Immunohistochemistry）作為最早的空間蛋白組學(xué)技術(shù)，衍生出了很多新興的研究方法。IHC是利用抗原-抗體特異性結(jié)合的原理，通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑顯色以確定細(xì)胞內(nèi)抗原，并對(duì)其進(jìn)行定位、定性及定量的研究。隨著空間蛋白組學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，利用IHC進(jìn)行的傳統(tǒng)多標(biāo)記方案，也就是在連續(xù)切片上進(jìn)行單標(biāo)染色，很明顯已經(jīng)不能適用于研究人員的高通量檢...

在人類與癌癥曠日持久的斗爭(zhēng)中，科學(xué)家們不斷深入探究腫瘤的復(fù)雜生態(tài)系統(tǒng)——腫瘤微環(huán)境(TumorMicroenvironment,TME)，這一領(lǐng)域的突破性進(jìn)展正逐步揭開癌癥發(fā)生、發(fā)展與轉(zhuǎn)移的神秘面紗。TME，這個(gè)由腫瘤細(xì)胞、免疫細(xì)胞、血管、細(xì)胞外基質(zhì)以及多種生物活性分子共同構(gòu)建的微宇宙，不僅是癌癥生物學(xué)研究的前沿陣地，也是精準(zhǔn)醫(yī)療和免疫治療策略的靶標(biāo)所在。TME研究熱度有關(guān)腫瘤微環(huán)境的研究，近幾年在Pumbed上發(fā)文章的數(shù)量和項(xiàng)目數(shù)量每年都在增長(zhǎng)，這些統(tǒng)計(jì)信息表明，腫瘤微環(huán)境...