背景介紹:自從2013年榮獲諾貝爾獎(jiǎng)后,外泌體就一直是國際科研界的研究熱點(diǎn)。近十年來,它的熱度一直居高不下,如今依然穩(wěn)坐在國自然熱點(diǎn)排行榜的第五名!讓我們繼續(xù)揭開這個(gè)細(xì)胞外囊泡的神秘面紗!外泌體個(gè)人名片:姓名:外泌體(Exosome);種屬:細(xì)胞外囊泡;大?。褐睆?0-150nm;密度:1.1-1.18g/mL;形狀:呈“茶托狀”;來源:由所有活細(xì)胞分泌;存在:幾乎存在于所有的組織、細(xì)胞間隙、體液中;數(shù)量:人體中大約有1014個(gè),近乎于平均每個(gè)細(xì)胞產(chǎn)生1000-10000個(gè);...
檢測(cè)原理:細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí),會(huì)激活一些DNA內(nèi)切酶,這些內(nèi)切酶會(huì)切斷核小體間的基因組DNA,產(chǎn)生180bp-200bp的DNA片段?;蚪MDNA雙鏈或單鏈斷裂時(shí)會(huì)出現(xiàn)產(chǎn)生大量的粘性3'-OH末端,可在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶(TdT)的催化作用下,與熒光素、過氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標(biāo)記到DNA的3'-末端,從而通過光學(xué)顯微鏡、熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀直接進(jìn)行凋亡細(xì)胞的檢測(cè),這類方法稱為脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法(Terminal-deoxynu...
脫氧核糖核酸又稱去氧核糖核酸,是一種分子,可組成遺傳指令,以引導(dǎo)生物發(fā)育與生命機(jī)能運(yùn)作。主要功能是長(zhǎng)期性的資訊儲(chǔ)存,可比喻為“藍(lán)圖”或“食譜”。其中包含的指令,是建構(gòu)細(xì)胞內(nèi)其他的化合物,如蛋白質(zhì)與RNA所需。帶有遺傳訊息的DNA片段稱為基因,其他的DNA序列,有些直接以自身構(gòu)造發(fā)揮作用,有些則參與調(diào)控遺傳訊息的表現(xiàn)。DNA是一種長(zhǎng)鏈聚合物,組成單位稱為核苷酸,而糖類與磷酸分子借由酯鍵相連,組成其長(zhǎng)鏈骨架。每個(gè)糖分子都與四種堿基里的其中一種相接,這些堿基沿著DNA長(zhǎng)鏈所排列而成...
概述:生命誕生于3D環(huán)境,所以傳統(tǒng)的2D細(xì)胞培養(yǎng)方法,雖然可以保證細(xì)胞的生長(zhǎng)和對(duì)外界刺激產(chǎn)生生理反應(yīng),但是和實(shí)際生活環(huán)境的巨大差異會(huì)導(dǎo)致大部分生理功能受限。比如,2D培養(yǎng)環(huán)境下的細(xì)胞間的相互作用是XY軸的,只是細(xì)胞層之間的作用,缺乏Z軸方向的影響,這樣就沒有養(yǎng)料、氧氣和外界刺激物(如:藥物處理)的梯度滲透作用。而3D培養(yǎng)環(huán)境下細(xì)胞可以變成細(xì)胞球,從而可以體現(xiàn)出Z軸細(xì)胞之間的力作用和各種物質(zhì)的滲透梯度,和體內(nèi)的差異相較2D細(xì)胞層會(huì)大大縮小,從而提高體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。利用體外...
Jurkat(CloneE6-1)概述:Jurkat(CloneE6-1)細(xì)胞,人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞,是肯德爾·史密斯博士將Jurkat細(xì)胞在41°C孵育48h,于巨噬細(xì)胞上進(jìn)行有限稀釋克隆得到的,Jurkat(CloneE6-1)細(xì)胞是從14歲男性急性T細(xì)胞白血病患者的外周血建立的。在用佛波酯和針對(duì)T3抗原的凝集素或單克隆抗體刺激后產(chǎn)生大量的IL-2(需要兩種刺激物誘導(dǎo)IL-2的產(chǎn)生)??捎糜诿庖呦到y(tǒng)疾病研究、免疫學(xué)和免疫腫瘤學(xué)研究,該細(xì)胞株克服了Jurkat細(xì)胞系建立初...
研究背景卵巢癌是卵巢腫瘤的一種惡性腫瘤,是指生長(zhǎng)在卵巢上的惡性腫瘤,其中90%~95%為卵巢原發(fā)性的癌,另外5%~10%為其它部位原發(fā)的癌轉(zhuǎn)移到卵巢。由于卵巢癌早期缺少癥狀,即使有癥狀也不特異,篩查的作用又有限,因此早期診斷比較困難,就診時(shí)60%~70%已為晚期,而晚期病例又療效不佳。因此,雖然卵巢癌的發(fā)病率低于宮頸癌和子宮內(nèi)膜癌居?jì)D科惡性腫瘤的第三位,但死亡率卻超過宮頸癌及子宮內(nèi)膜癌之和,高居?jì)D科癌癥前列,是嚴(yán)重威脅婦女健康的最大疾患。化療耐藥性是卵巢癌治療失敗的主要原因,...
什么是鐵死亡?鐵死亡(ferroptosis)是細(xì)胞在小分子物質(zhì)誘導(dǎo)下發(fā)生的氧化性細(xì)胞死亡,具有鐵離子依賴性。研究發(fā)現(xiàn),鐵死亡與神經(jīng)退行性疾病、腫瘤、動(dòng)脈硬化、糖尿病、急性腎損傷等多種疾病相關(guān),致病機(jī)理復(fù)雜,并可通過激活或抑制鐵死亡來干預(yù)疾病的發(fā)展,因此鐵死亡成為近年來的研究熱點(diǎn)。圖1鐵死亡發(fā)生機(jī)制[1]鐵死亡發(fā)生機(jī)制鐵死亡是亞鐵離子和活性氧(reactiveoxygenspecies,ROS)依賴的脂質(zhì)過氧化物累積引起的。鐵死亡的發(fā)生機(jī)制如圖1,其上游通路是通過直接或間接影...
腫瘤微環(huán)境癌癥的發(fā)生與腫瘤微環(huán)境有著密切的聯(lián)系,腫瘤微環(huán)境(Tumormicroenvironment,TME)是指腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生和生活的內(nèi)環(huán)境,且具有異質(zhì)性,由腫瘤細(xì)胞及其募集的各種基質(zhì)細(xì)胞如巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞、成纖維細(xì)胞以及相關(guān)細(xì)胞因子組成,腫瘤微環(huán)境中的巨噬細(xì)胞被稱為腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(Tumor-associatedmacrophages,TAMs),是TME中最重要的免疫細(xì)胞之一。圖瘤內(nèi)NK細(xì)胞缺乏豐富的膜突起免疫細(xì)胞中的“臥底”——TAMs殺傷腫瘤?誘導(dǎo)機(jī)體免疫應(yīng)答?N...
