猴痘(Monkeypox,MPX)是由猴痘病毒(Monkeypoxvirus,MPXV)引起的一種病毒性人畜共患病,其屬于正痘類病毒,癥狀表現(xiàn)類似于天花,常見癥狀表現(xiàn)為發(fā)燒(通常在38.5℃到40.5℃之間)、頭痛、肌肉酸痛、淋巴結(jié)腫大及皮疹等[1]。自1970年報告了第一例患者以來,猴痘主要在非洲地區(qū)流行。但2022年5月,猴痘開始了全球范圍的大流行,已有113個國家(地區(qū))報告了89000多例猴痘確診病例,包含152例死亡病例。2023年6月,我國多個省份先后報告多例猴痘...
一、概念:細胞凋亡:由基因控制的細胞自主的有序的死亡,是高度調(diào)控的過程,故又稱為細胞的程序性死亡。二、特征:細胞壞死是病理狀態(tài)下由損傷因子誘導(dǎo)產(chǎn)生的自溶現(xiàn)象,表現(xiàn)為:細胞皺縮變小、質(zhì)膜起泡、染色體凝縮、細胞核碎裂、DNA片段化以及吞噬體最終吞噬細胞。圖1細胞凋亡與細胞壞死過程三、檢測試劑盒1、AnnexinV/PI檢測試劑盒根據(jù)細胞凋亡過程中的變化,可以通過多種途徑對其進行檢測,目前市面上常用的試劑盒包括一下幾種:AnnexinV-FITC/PI細胞凋亡檢測試劑盒(abs50...
細胞凍存是細胞培養(yǎng)的重要環(huán)節(jié)之一。利用凍存技術(shù)將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復(fù)蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞,可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種,起到了細胞保種的作用。細胞凍存技術(shù)要點是慢凍,標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/min;當溫度達-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min。我們常用的傳統(tǒng)方法是將凍存管置于4℃30分鐘----20℃60分鐘----80...
什么是過氧化物酶鏈霉親和素(PeroxidaseStreptavidin,SA-HRP)?鏈霉親和素(Streptavidin,簡稱SA)是從細菌阿維丁鏈霉菌中純化出的一種60kDa的蛋白質(zhì)。鏈霉親和素同源四聚體對生物素(即維生素B7)具有很高的親和力。而過氧化物酶鏈霉親和素就是將過氧化物酶(HorseradishPeroxidase,縮寫為HRP)偶聯(lián)在鏈霉親和素上形成,可與Biotin標記的各種親和純化抗體或者Biotin標記的色譜級蛋白聯(lián)用進行各種免疫檢測。SA-HRP...
Q1:轉(zhuǎn)移性的癌類器官,是用轉(zhuǎn)移部位的癌類器官培養(yǎng)基還是原發(fā)部位的癌類器官培養(yǎng)基比較好?答:我們查閱大量文獻,構(gòu)建原發(fā)腫瘤和轉(zhuǎn)移癌的類器官都是用的適合原發(fā)腫瘤的類器官培養(yǎng)基,比如腸癌的原發(fā)灶和轉(zhuǎn)移灶,乳腺癌的原發(fā)灶與轉(zhuǎn)移灶,所以用原發(fā)部位的癌類器官培養(yǎng)基比較好。Q2:轉(zhuǎn)移性的類器官形態(tài)和轉(zhuǎn)移部位的癌類器官長得像還是和原發(fā)部位的癌類器官長得像?答:轉(zhuǎn)移性的類器官形態(tài)和原發(fā)性的比較像。Q3:做胰腺癌類器官藥篩,對于加藥時,類器官的大小有推薦嗎?或者說鋪板幾天后加藥比較好呢?答:類...
一、類器官收集及洗滌1、類器官收集移液器吸去培養(yǎng)基,每孔添加1-2mL左右4℃類器官傳代培養(yǎng)緩沖液(abs9730),輕柔吹打基質(zhì)膠,收集在15mL離心管中(24孔板,每5孔為一組),加類器官傳代緩沖液定容至10mL(緩沖液越多,基質(zhì)膠被稀釋的越充分,越容易去除),4℃靜置10min或-20℃放置5min(目的是使基質(zhì)膠軟化,如果冰箱保溫效果強,冷凍3min),300g4℃,離心5min棄上清。2、類器官清洗添加1mL類器官傳代培養(yǎng)緩沖液重懸,300g4℃,離心5min棄上清...
小分子化合物是指分子量小于1000Da(尤其小于500Da),具有生物學(xué)活性的化合物。其與細胞因子和蛋白不同,小分子化合物可以透過細胞膜進入細胞,發(fā)揮相應(yīng)的生物學(xué)功能。小分子化合物的作用靶點眾多,已廣泛應(yīng)用于腫瘤學(xué)、免疫學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)、表觀遺傳學(xué)、干細胞、類器官、細胞凋亡、離子通道和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等生命科學(xué)諸多重要的研究領(lǐng)域。小分子化合物主要通過調(diào)節(jié)其蛋白靶點的活性發(fā)揮作用。目前小分子化合物的蛋白靶點主要包括酶、離子通道和受體三大類。表1小分子化合物的分類及作用機制分類作用機制酶的...
微生物污染是一直是細胞培養(yǎng)的一個主要問題,大到諸如細胞間、層流室這種實驗室的設(shè)計布局,小到每一次試劑外包裝的消毒,都是在為了細胞免受外源微生物的侵害。應(yīng)各位老師們的要求,今天這篇文章主要講解細胞房的除菌方案,順便討論一下常見的無菌操作漏洞。當您和同門的細胞頻繁出現(xiàn)污染,更換試劑之后仍然不能改善,細胞丟棄一波又一波,建議為細胞間來場消毒吧。無論是紫外線照射(物理方法)還是甲醛加高錳酸鉀熏蒸,都是為了盡可能的殺滅空氣中的微生物。圖1細胞室一、紫外線照射法紫外線按照波長劃分為四個波...
