外周血單個(gè)核細(xì)胞（PeripheralBloodMononuclearCells，PBMC）是外周血（即除骨髓以外的血液）中具有單個(gè)核的細(xì)胞的混合細(xì)胞群體，包括自然殺傷細(xì)胞（naturalkillercell，NK）、T淋巴細(xì)胞（70%-90%）、B淋巴細(xì)胞。能夠進(jìn)一步分離純化，是免疫細(xì)胞的主要來源。表1PBMC組分及占比組分占比單核細(xì)胞10-30%淋巴細(xì)胞70-90%T淋巴細(xì)胞（CD3+)45-70%CD4+T淋巴細(xì)胞CD3+T淋巴細(xì)胞的25-60%CD8+T淋巴細(xì)胞CD3...

一、什么是TCR-T細(xì)胞療法?目前，腫瘤免疫治療方興未艾，群雄并起，其中有效的治療策略之一就是過繼細(xì)胞轉(zhuǎn)移療法（ACT）。嵌合抗原受體（CAR）和工程化T細(xì)胞受體（TCR）是近年來主要的過繼性T細(xì)胞免疫療法。TCR（Tcellreceptor）是T細(xì)胞表面的特異性受體，其α鏈和β鏈由高質(zhì)量、高親和力的抗原特異性T細(xì)胞克隆產(chǎn)生，以非共價(jià)鍵與CD3結(jié)合，形成TCR-CD3復(fù)合物，通過識(shí)別并結(jié)合MHC呈遞的抗原從而激活T細(xì)胞，促進(jìn)T細(xì)胞的分裂與分化；其作用機(jī)制是向普通T細(xì)胞中引入新...

“你好，我的樣本是養(yǎng)的細(xì)胞，我還能做多色組化嗎？”答案是可以！對于多重?zé)晒饷庖呓M化（mIHC）來說，幾乎不挑剔樣本類型，但需要攻克一個(gè)難題——多輪洗脫。傳統(tǒng)的組織樣本經(jīng)過前期處理固定包埋，再加上防脫載玻片的助力，在洗脫過程中，脫片概率相對小，即使有小部分脫落，但影響不至于很大；而細(xì)胞樣本，有可能在一張片子上，本身細(xì)胞數(shù)量就不多，如果還有脫落，可能最后“顆粒無收”。今天Absin分享的是細(xì)胞樣本做多色的方法，其中不能缺少的依舊是我們的“老演員”——抗體洗脫液（abs994）。一...

近年來，腫瘤免疫療法在癌癥治療中非?；馃帷Ｄ[瘤免疫學(xué)治療的目的是激發(fā)或調(diào)動(dòng)機(jī)體的免疫系統(tǒng)，增強(qiáng)腫瘤微環(huán)境抗腫瘤免疫力，從而控制和殺傷腫瘤細(xì)胞。隨著免疫治療的興起也推動(dòng)了腫瘤研究的發(fā)展，但是由于人源化體系的復(fù)雜性、免疫系統(tǒng)的部分或無效重組建等問題，致使免疫腫瘤模型面臨著巨大的挑戰(zhàn)，臨床上迫切需要能夠用于個(gè)體化驗(yàn)證療效的體外模型。類器官的出現(xiàn)給腫瘤免疫治療提供了新的契機(jī)，然而，現(xiàn)有的類器官中缺乏免疫細(xì)胞限制了其發(fā)展。小愛這次給大家介紹一下基本的腫瘤類器官免疫共培養(yǎng)方法，如下：1、...

胰腺癌對化療或免疫治療的應(yīng)答率較低。雖然微創(chuàng)不可逆電穿孔(IRE)消融術(shù)是治療不可切除胰腺癌的一種選擇，但是這種腫瘤類型的免疫抑制腫瘤微環(huán)境容易導(dǎo)致腫瘤復(fù)發(fā)。因此，加強(qiáng)內(nèi)源性適應(yīng)性抗腫瘤免疫是提高消融治療和消融后免疫治療效果的關(guān)鍵。近日，上海交通大學(xué)王忠敏教授和崔文國教授在Naturecommunications(IF=16.6)上發(fā)表了題為“Interventionalhydrogelmicrospherevaccineasanimmuneampli?erforactiva...

間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymalstemcells，MSCs）是來源于中胚層的多能成體干細(xì)胞，廣泛存在于臍帶、骨髓、脂肪、牙髓、月經(jīng)血等組織，體外培養(yǎng)可分化為成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞等多種類型的細(xì)胞。圖1TheMesengenicProcess（圖片來源于文獻(xiàn)，僅供學(xué)習(xí)參考用）MSCs具有自我更新能力和多向分化潛能，能夠釋放出許多具有抗凋亡、免疫調(diào)節(jié)、促血管生成等功能的生物活性因子，可刺激組織器官再生，并且低水平表達(dá)主要組織相容性復(fù)合體（MHC）Ⅰ類分子，不表達(dá)MHC...

染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)的原理是在活細(xì)胞狀態(tài)下固定蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合物，并將其隨機(jī)切斷為一定長度范圍內(nèi)的染色質(zhì)小片段，然后通過免疫學(xué)方法沉淀此復(fù)合體，特異性地富集目的蛋白結(jié)合的DNA片段，通過對目的片斷的純化與檢測，從而獲得蛋白質(zhì)與DNA相互作用的信息。一、細(xì)胞交聯(lián)與裂解在裝有20ml生長培養(yǎng)基的150mm培養(yǎng)皿中培養(yǎng)貼壁細(xì)胞，長到80%-90%密度，約107個(gè)細(xì)胞。如有必要，可進(jìn)行刺激或處理。建議采用1×106個(gè)細(xì)胞作為一次ChIP的細(xì)胞量。1）在20ml培養(yǎng)基中加入終濃度為1...

一、前言：多重?zé)晒饷庖呓M化(mIHC)主要的技術(shù)原理來自TSA技術(shù)，TSA即酪酰胺信號(hào)放大，是一類利用辣根過氧化酶(HRP)對靶蛋白或核酸進(jìn)行高密度原位標(biāo)記的酶學(xué)檢測方法。用這種方法做多重?zé)晒馊旧抢枚股蠋в械腍RP（而不是直接偶聯(lián)熒光素），來催化后續(xù)添加入體系的非活性熒光素，該熒光素在HRP和過氧化氫的作用下被活化，跟臨近蛋白的酪氨酸殘基共價(jià)偶聯(lián)，使得蛋白樣品與熒光素穩(wěn)定結(jié)合。然后進(jìn)行微波處理，前一輪非共價(jià)結(jié)合的抗體被洗掉，共價(jià)結(jié)合的熒光素還留存在樣品上。再換個(gè)一抗來第...