HEK293細(xì)胞系家族歷史概覽1973年科學(xué)家從一個(gè)父母譜系不祥的人類流產(chǎn)胚胎的腎臟中分離出最原始的人胚腎細(xì)胞,即293細(xì)胞(humanembryonickidney(HEK)293cellline),該細(xì)胞被轉(zhuǎn)入修改后的5型腺病毒DNA片段,一開(kāi)始轉(zhuǎn)化非常困難,一直到幾個(gè)月后,科學(xué)家得到一個(gè)穩(wěn)定的可以快速生長(zhǎng)的293單克隆細(xì)胞株,自此HEK293誕生。HEK293細(xì)胞在細(xì)胞生物學(xué)和生物技術(shù)中的應(yīng)用頻率僅次于第一個(gè)人類細(xì)胞系HeLa,并衍生出數(shù)百種克隆細(xì)胞系。SV40larg...
細(xì)胞消化液是細(xì)胞培養(yǎng)與實(shí)驗(yàn)中的關(guān)鍵工具,其原理主要通過(guò)酶解作用破壞細(xì)胞間的連接,使細(xì)胞從組織或培養(yǎng)基質(zhì)上分離成單個(gè)細(xì)胞,以便進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。常用的細(xì)胞消化液包括胰蛋白酶、EDTA和膠原酶等,它們能夠特異性地水解細(xì)胞表面的蛋白質(zhì),包括細(xì)胞外基質(zhì)中的膠原蛋白、纖維連接蛋白等,從而改變細(xì)胞間的連接狀態(tài)。配方方面,細(xì)胞消化液的配制需根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求精確稱取適量的酶粉,并加入適當(dāng)?shù)木彌_液(如D-Hanks液)中,調(diào)節(jié)pH值至適宜范圍(通常為7.2-7.4),以確保酶的最佳活性。同時(shí),還需注意...
概述免疫細(xì)胞培養(yǎng)的六個(gè)基本流程:樣本制備、細(xì)胞分選、分型鑒定、擴(kuò)增&培養(yǎng)、質(zhì)量?jī)?yōu)化、后續(xù)研究。小愛(ài)已經(jīng)給大家詳細(xì)介紹了《免疫細(xì)胞培養(yǎng)攻略之樣本制備(一)》和《免疫細(xì)胞培養(yǎng)攻略之細(xì)胞分選(二)》,《免疫細(xì)胞培養(yǎng)攻略之分型鑒定(三)》今天我們繼續(xù)一起學(xué)習(xí)擴(kuò)增&培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)。從樣本制備到細(xì)胞分選、分型鑒定,我們終于獲得了純度高、活性好的目的細(xì)胞之后,便需要在體外人工模擬其在體內(nèi)的生長(zhǎng)環(huán)境,同時(shí)保證無(wú)菌、適宜的溫度和pH,給予免疫細(xì)胞充足的營(yíng)養(yǎng)使其不斷生長(zhǎng)繁殖,這個(gè)過(guò)程便是擴(kuò)增&培...
在生物醫(yī)學(xué)研究的廣闊領(lǐng)域中,細(xì)胞活性檢測(cè)扮演著至關(guān)重要的角色。它不僅幫助科學(xué)家們?cè)u(píng)估細(xì)胞的生存狀態(tài),還能深入了解細(xì)胞對(duì)藥物、環(huán)境變化或病理過(guò)程的響應(yīng)。細(xì)胞活性檢測(cè)通常包括測(cè)量細(xì)胞增殖、細(xì)胞毒性和細(xì)胞死亡等方面。今天,小愛(ài)向大家介紹細(xì)胞活性檢測(cè)的六大常用方法:ATP生物發(fā)光法、LDH檢測(cè)法、MTT比色法、CCK-8法、熒光染料法和細(xì)胞凋亡檢測(cè)法,一起揭秘細(xì)胞活力的科學(xué)奧秘。1、ATP生物發(fā)光法細(xì)胞內(nèi)ATP(腺苷三磷酸)的含量是細(xì)胞能量代謝的直接指標(biāo)。ATP生物發(fā)光法通過(guò)測(cè)量細(xì)胞...
TLS三級(jí)淋巴結(jié)構(gòu)作為現(xiàn)在很熱門的研究領(lǐng)域,小愛(ài)今天來(lái)解讀一篇發(fā)表在Science的綜述;三級(jí)淋巴結(jié)構(gòu)在癌癥的研究《Tertiarylymphoidstructuresincancer》這張圖片提供了一個(gè)關(guān)于三級(jí)淋巴結(jié)構(gòu)(TertiaryLymphoidStructures,TLS)在癌癥中的不同狀態(tài)的概覽。它從幾個(gè)關(guān)鍵方面對(duì)TLS進(jìn)行了分類和描述:1、位置(Localization):-Peritumoral:指腫瘤周圍的TLS,它們位于腫瘤邊緣。-Intratumoral...
1、什么是CHIP、CHIP研究什么?CHIP全稱染色質(zhì)免疫沉淀法,是一種用于研究蛋白質(zhì)與DNA相互作用的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。它可以用來(lái)檢測(cè)特定的蛋白質(zhì)-DNA相互作用,如組蛋白、轉(zhuǎn)錄因子等與基因組特定區(qū)域的結(jié)合情況。ChIP技術(shù)可以幫助研究者了解細(xì)胞或組織中的基因表達(dá)和調(diào)控機(jī)制。圖1組蛋白八聚體*名詞解釋組蛋白:真核生物細(xì)胞核中的一種堿性蛋白質(zhì),它們的主要功能是幫助DNA分子的壓縮和組織,使其能夠適應(yīng)細(xì)胞核內(nèi)有限的空間。組蛋白與DNA一起構(gòu)成了染色體的基本結(jié)構(gòu)單元,稱為核小體。轉(zhuǎn)錄因...
在科學(xué)研究的漫長(zhǎng)征途中,每一個(gè)細(xì)節(jié)都可能影響實(shí)驗(yàn)的成敗。而實(shí)驗(yàn)室耗材,作為實(shí)驗(yàn)過(guò)程中常用的工具,其質(zhì)量與性能直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和效率。愛(ài)必信(上海)生物科技有限公司擁有超200種的實(shí)驗(yàn)耗材產(chǎn)品,均采用優(yōu)質(zhì)材料制成,覆蓋了生化實(shí)驗(yàn)室常用耗材。如微孔板、深孔板、平底發(fā)光板、酶標(biāo)板、PCR板、吸頭、吸管、離心管、PCR管、流式管、磁珠、儲(chǔ)液槽、細(xì)胞培養(yǎng)皿、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞篩網(wǎng)、細(xì)胞爬片等。一、均相檢測(cè)微孔板微孔板(96孔板,白色,淺孔)(abs7308)產(chǎn)品特點(diǎn):該...
免疫(共)沉淀(IP/CoIP)是基于抗體和蛋白的特異性親和作用,通過(guò)捕獲與蛋白或抗原特異性結(jié)合的抗體,進(jìn)而從復(fù)雜的樣品中捕獲及富集目標(biāo)蛋白,同時(shí)可以測(cè)定與之相互作用的蛋白或其它生物大分子。CoIP原理圖CoIP實(shí)驗(yàn)對(duì)照的設(shè)置方法常見(jiàn)的主要有三種方式:1)第一種是實(shí)驗(yàn)組轉(zhuǎn)染誘餌蛋白和標(biāo)簽蛋白,對(duì)照組只轉(zhuǎn)染標(biāo)簽蛋白,這種方法不僅可以提高誘餌蛋白的表達(dá)量,增加實(shí)驗(yàn)的成功率,而且標(biāo)簽抗體的成本低,親和力強(qiáng),但是畢竟不是本身生理狀態(tài)下的表達(dá)量,和實(shí)際結(jié)果可能有出入,而且需要構(gòu)建載體,...
