1、標本固定：固定的目的是：①，防止標本從玻片上脫落；②，除去防礙抗原—抗體結合的類脂，使抗原抗體結合物易于獲得良好的染色結果；③，固定的標本易于保存。固定劑的選擇一般用4%多聚甲醛。2、脫水、石蠟包埋和制片：脫水用梯度乙醇（由低到高）充分脫水、對組織要*浸蠟、切片時刀片要干凈和鋒利。否則容易裂片和脫片等。3、脫蠟和水化：這是為了后面的抗體等試劑能夠充分與組織中抗原等結合反應。脫蠟可以先60度20min，然后立即二甲苯1-3分別10min，但當天制好的切片可以60度3-4h。...

Q:什么是霍亂毒素？A:霍亂毒素由（Choleratoxin,CT）兩個亞單位組成，即A亞單位（CTA）和B亞單位（CTB）。A亞單位是霍亂毒素的活性部分，B亞單位的主要功能是通過與哺乳動物小腸上皮細胞上的單唾液酸神經(jīng)節(jié)苷脂GM1結合而使得A亞單位進入細胞。Q:霍亂毒素是如何反激活的？A:霍亂毒素由霍亂操縱子（ctx）編碼，從5'到3'方向，依次是反激活因子ToxR的識別序列、啟動子、A基因（ctxA）、B基因（ctxB）和不依賴于r因子的轉錄終止系列。現(xiàn)在普遍認為操縱子中只...

血清小知識血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，而且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等，其主要作用是提供基本營養(yǎng)物質、提供激素和各種生長因子、提供結合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷、對培養(yǎng)中的細胞的起到某些保護作用。胎牛血清應取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內的新生牛;小牛血清取自出...

檢測某一個基因的表達產(chǎn)物或者要比較表達產(chǎn)物量的相對變化，方法是westernblot。而WesternBlot試驗中比較這些的前提條件是等量的細胞上樣，這樣才有比較的基礎。而人為的操作會產(chǎn)生一定的誤差，這些誤差可以通過測定每個樣品中實際轉到膜上的內參來校正。因此選擇一個合適的內參抗體來校正上樣誤差是非常重要的。所以嚴謹?shù)腤esternBlot實驗設計中需要有良好的參照體系，后續(xù)的實驗結果分析才具有說服性。在WesternBloting實驗中，可能內參即是內部參照(Intern...

激動劑抑制劑可抑制腸神經(jīng)系統(tǒng)釋放ACh,減緩胃腸道動力.在健康人，哌波色羅能對抗西沙必利對結腸的促動力作用，延緩結腸傳輸，但不改變結腸的感覺和順應性；拮抗外源性.5-HT所致的腸道蠕動反射。在腹瀉型IBS患者中，哌波色羅可以延長口-盲傳輸，使結腸蠕動減弱，降低直腸敏感性，從而改善患者的癥狀。激動劑抑制劑可升高觸發(fā)小腸蠕動的壓力感受閾值和降低小腸壁的順應性。Meuse等發(fā)現(xiàn)在脊髓背角淺層初級傳入神經(jīng)末梢有5-HT7受體的表達，參與大鼠傷害性感受器的激活。目前尚無5-HT7受體制...

細胞因子還廣泛效果于神經(jīng),內分泌系統(tǒng),對細胞間相互效果、細胞的增殖分解和效應功用有重要的調節(jié)效果.細胞因子發(fā)揮廣泛多樣的生物學功用是經(jīng)過與靶細胞膜外表的受體相結合并將信號傳遞到細胞內部.因此,了解細胞因子受體的結構和功用關于深入研究細胞因子的生物學功用是*的.跟著對細胞因子受體的深入研究，發(fā)現(xiàn)了細胞因子受體不同亞單位中有同享鏈現(xiàn)象，這對說明很多細胞因子生物學活性的相似性和差異性從受體水平上提供了根據(jù)。絕大多數(shù)細胞因子受體存在著可溶性方式，把握可溶性細胞因子受體發(fā)生的規(guī)則及其生...

在westernBlot過程中，蛋白Marker雖然是其中小小的一環(huán)，但是這個小細節(jié)對實驗結果的影響不可忽視。Marker在蛋白電泳中的作用主要是用來指示蛋白條帶所對應的分子量大小，只有標準量無誤，實驗結果才有說服力。此外，Marker還能顯示轉膜是否成功以及蛋白在凝膠上的電泳程度的作用。因此選擇正確的蛋白Marker也是westernblot實驗成功的必要條件之一?？傮w來說，蛋白分子量標準可以分成未染蛋白分子量標準、預染蛋白分子量標準二個級別。未染色的蛋白分子量標準未染色的...

淋巴細胞分離液取新鮮抗凝血1ml，與生理鹽水1:1混勻后，小心加于2ml細胞分離液之液面上；以400g（約1500轉/分，半徑15cm水平轉子）離心20分鐘，此時離心管中由上至下細胞分四層。*層：為血漿層。第二層：為環(huán)狀乳白色淋巴細胞層。第三層：為透明分離液層。第四層：為紅細胞層。收集第二層細胞放入含生理鹽水4-5ml的試管中，充分混勻后，以400g（約1500轉/分）離心20分鐘。沉淀經(jīng)2次洗滌后即得所需淋巴細胞。淋巴細胞分離液方法，取肝素抗凝血1ml加Hanks液1m1稀...