隨著2015年精準(zhǔn)醫(yī)療計(jì)劃的提出，液體活檢技術(shù)備受關(guān)注。液體活檢常見(jiàn)的三種有效素材主要有：游離DNA（circulatingcell-freeDNA，cfDNA）、循環(huán)腫瘤DNA（circulatingtumorDNA，ctDNA）和外泌體。圖1液體活檢方案。人體血液中含有細(xì)胞、胞外膜囊泡（EMVS）、游離DNA（cfDNA）、游離RNA（cfRNA）和蛋白質(zhì)，可作為各種疾病的生物標(biāo)志物一、什么是游離DNA?游離DNA又稱循環(huán)DNA、無(wú)細(xì)胞DNA，是指存在于血漿、血清或尿液等...

蛋白酶是一種絲氨酸蛋白水解酶。在脊椎動(dòng)物中，它作為消化酶而發(fā)揮作用。胰腺是人類體內(nèi)能合成和儲(chǔ)存大量胰蛋白酶的器官。當(dāng)我們攝入食物時(shí)，胰腺就會(huì)分泌出含有胰蛋白酶的胰液，協(xié)同其他酶類一起將食物分解成更小的分子，促進(jìn)食物被吸收和利用。胰蛋白酶的分子式為C52-H90-N18-O20-S1，分子量為5110.85Da。它由三個(gè)多肽鏈組成：A、B、C。其中，鏈A和鏈B之間通過(guò)二硫鍵連接起來(lái)，組成酶的主體結(jié)構(gòu)；鏈C，則是一個(gè)多余的序列，與酶的催化活性無(wú)關(guān)。在胰腺細(xì)胞中，胰蛋白酶是以不活性...

一、我是誰(shuí)？外泌體是由所有細(xì)胞釋放的一類胞外囊泡，比細(xì)胞小很多，大小范圍為40—150nm。與細(xì)胞類似，外泌體由脂質(zhì)雙分子層膜構(gòu)成，膜上含有各種標(biāo)志性蛋白，可用于外泌體的鑒定和分離。內(nèi)含物中包含特定蛋白質(zhì)、RNA（mRNA、miRNA、IncRNA等）和DNA，其中miRNA的占比最多。外泌體除了存在于血漿、血清、尿液、腦脊液等人體體液中，還存在各種組織中，可以說(shuō)外泌體在人體中無(wú)處不在。圖1外泌體的組成二、我的功能有哪些？外泌體的功能取決于它們與受體細(xì)胞相互作用的能力，并將它...

黑膠蟲(chóng)污染是一個(gè)老生常談的話題。目前，科研界對(duì)黑膠蟲(chóng)的污染特征沒(méi)有統(tǒng)一的判定標(biāo)準(zhǔn)，通常污染特征總結(jié)有：1）活躍游動(dòng)或旋轉(zhuǎn)梭動(dòng)或原地顫動(dòng)（如視頻1、2、3所示）；視頻1活躍游動(dòng)視頻2旋轉(zhuǎn)梭動(dòng)視頻3原地顫動(dòng)2）呈桿狀、球狀、卵圓狀；3）培養(yǎng)基不渾濁；4）復(fù)蘇或傳代時(shí)往往會(huì)出現(xiàn)黑膠蟲(chóng)污染，并且與細(xì)胞呈現(xiàn)此消彼長(zhǎng)的現(xiàn)象。我們對(duì)多個(gè)黑膠蟲(chóng)樣本進(jìn)行測(cè)序鑒定，這里舉兩個(gè)典型鑒定結(jié)果給大家分享：圖1Sphingomonas（鞘氨醇單胞菌）單個(gè)及菌落圖屬名樣本2，15，21，27鑒定為Sphi...

一、肺癌類器官構(gòu)建——Organotial人肺癌類器官培養(yǎng)基試劑盒（abs9443）（1）取材后的組織須放在預(yù)冷的（2-8°C）組織保存液的取樣瓶中，快速轉(zhuǎn)運(yùn)至潔凈實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行組織處理和細(xì)胞分離，拍照并登記信息。（2）準(zhǔn)備若干培養(yǎng)皿，加入4℃預(yù)冷的原代培養(yǎng)緩沖液備用。（3）取樣瓶消毒，將組織放入培養(yǎng)皿中，利用原代培養(yǎng)緩沖液清洗三次后，去除雜質(zhì)，利用眼科剪或手術(shù)刀將組織剪切成體積約為1-3mm3的組織塊。（4）組織用人肺癌原代組織消化液消化，37℃震蕩消化10-20min（消化過(guò)...

Accutase細(xì)胞消化液是包含蛋白水解酶和膠原酶活性的一種細(xì)胞消化液，不含任何動(dòng)物和細(xì)菌來(lái)源組分。作為胰酶-EDTA消化液的替換產(chǎn)品，用于從常規(guī)組織培養(yǎng)器皿、粘附包被培養(yǎng)器皿和聚合物上消化細(xì)胞。Accutase比哺乳動(dòng)物源的胰酶和膠原酶更加有效，因其所含活性成分濃度更低，對(duì)細(xì)胞傷害更小且更溫和，但能維持相同效力。使用方法：1、4℃或冰浴融解Accutase，之后進(jìn)行分裝保存?！咀ⅰ浚翰豢?7℃融化本品，否則會(huì)影響酶活。2、使用不含鈣、鎂的1×Dulbecco'sPBS潤(rùn)洗細(xì)...

組織解離液是一種化學(xué)試劑，用于將組織樣本中的細(xì)胞分離開(kāi)來(lái)，從而得到單個(gè)的細(xì)胞或細(xì)胞群。它廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究、藥物研發(fā)和臨床診斷等領(lǐng)域。本文將介紹組織解離液的作用機(jī)理、常用類型以及在不同領(lǐng)域中的應(yīng)用。作用機(jī)理：組織解離液可以通過(guò)破壞細(xì)胞外膜或細(xì)胞間質(zhì)來(lái)使細(xì)胞分離。其中最常見(jiàn)的組織解離液成分包括胰蛋白酶、卡介苗、DNA酶、膠原酶等酶類，以及EDTA、EGTA等螯合劑，這些成分可以使細(xì)胞脫離基質(zhì)并保持其完整性。常用的組織解離液包括胰蛋白酶、卡介苗、DNA酶、膠原酶等。1.胰蛋白...

在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，首先要對(duì)新鮮取材的動(dòng)物組織等進(jìn)行處理，或用機(jī)械的方法，或用胰蛋白酶、膠原蛋白酶等處理一段時(shí)間，將組織分散成單個(gè)細(xì)胞即原代培養(yǎng)。在進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)，貼壁細(xì)胞需要重新用胰蛋白酶等處理，使之分散成單個(gè)的細(xì)胞。那么“胰蛋白酶”和“膠原蛋白酶”到底有什么區(qū)別呢？我們?cè)诩?xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)該如何選擇？盡管胰蛋白酶和膠原蛋白酶都是細(xì)胞培養(yǎng)中常用于將體積較小的組織塊分散成細(xì)胞團(tuán)或單細(xì)胞的消化液，但它們的作用機(jī)制及適用情況并不相同。一、胰蛋白酶的作用特點(diǎn)胰蛋白酶分離自牛、豬等動(dòng)物的胰，...